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跟着当代医药工业的逾越，序列分析已成为卵白质、多肽、抗体、疫苗类生物药物分子以及胶原卵白等医疗器械类产物的研发和质地松手中的紧要范例。卵白质的全序列考证分析饰演要害扮装，八成阐发重组卵白质多肽类生物成品的完好准确抒发，确保产物性量和有用性。

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百泰派克生物科技BTP基于CNAS/ISO9001双重质地认证体系，建造卵白测序平台，该平台配备多台N端序列分析仪、超高效液相色谱高别离质谱联用、经过多轮优化的卵白从新测序算法平台。长入先进的分析开导和算法，BTP八成对卵白质进行全序列考证分析，确保卵白质的完好性和准确性，以感奋您的策划和质地松手需求。

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液质联用（LC-MS/MS）卵白全序列考证分析:

卵白全序列考证分析的一般历程是使用特异性卵白酶对卵白质分子进行酶解切割，酶解后的供试品是复杂的肽段构成的夹杂物，然后通过液质联用平台对供试品进行质谱分析。

领先，是对样本进行前惩办，即左证卵白全长表面氨基酸序列长入质谱级别卵白酶酶切位点信息遴荐至少五种卵白酶对卵白进行酶切，擢升酶切成果，以便得回更高的袒护度。本体现实中不错从多种卵白酶（Trypsin、Chymotrypsin、Asp-N、Glu-C、Lys-C和Lys-N等）中遴荐适当的卵白酶或者组合酶切的神气对靶卵白进行酶切；其次，使用液质联用Nano-LC-MS/MS 平台对酶切之后的肽段夹杂物进行分析，得到总离子流色谱图和质谱原始数据；然后，以所测定卵白的表面序列建造腹地数据库，通过专科分析软件匹配并计较每一种酶切之后松弛到的肽段；期骗酶切位点之间的互补性对卵白序列进行拼接，最终达成卵白全序列考证。

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案例涌现图:

抗体轻链全序列考证分析涌现图

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一般历程：

1、使用多种卵白酶组合酶切的神气对卵白进行酶切，擢升酶切成果，以便得回卵白每一个氨基酸的序列信息。

2、使用 Nano-LC-MS/MS 液质联用高别离平台对样品进行分析。

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3、将得到的质核比信息与表面序列建造的数据库进行比对。

4、拼接每种酶切神气松弛到的肽段，得到卵白是否完好正确抒发的信息。

现实仪器:

液相色谱仪（Easy-nLC1200）|电喷雾-组合型四级杆-Orbitrap 质谱仪（Q Exactive™ HybridQuadrupole-Orbitrap™ Mass Spectrometer ）

应用:

卵白质、多肽、抗体、疫苗、胶原卵白等生物成品的氨基酸全序列考证分析|卵白质翻译后修饰和化学修饰分析|卵白质、多肽、抗体、疫苗、胶原卵白等生物成品的氨基酸序列突变分析

常见问题:

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问题1：袒护度能反馈什么问题呢？若袒护度不及100%该何如惩办？

恢复：袒护度是指被测序到的序列占全序列大小的比率。反应了咱们的测序舍弃关于咱们卵白的袒护情况，若袒护率为100%代表样品经酶解惩办之后得到的序列与联想序列高度吻合，若袒护率不及100%，咱们会审查卵白质数据和序列，稽查缺失几许序列以及哪些表面上的肽段未检测到；左证本体舍弃判断是否持续使用现存范例和酶解惩办，再行得回肽遗失的位置，一经卵白样品自身发生了突变，需要进行从新测序分析。

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问题2：念念要进行测序的卵白质分子量较小，怎样进行卵白样品制备？

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恢复：如若卵白分子量相比小，不错使用浓度较高的SDS-PAGE胶将卵白质进行分离葡京娱乐彩票网，然后对卵白胶进行考马斯亮蓝染色，再将与方针卵白大小一致的卵白条带切割下来，切下来的卵白胶条用于质谱松弛。

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